目的:证实磷酸二酯酶(PDE)是否参与下调视网膜色素上皮(RPE)细胞中的cGMP水平。 方法:在培养的RPE细胞(D407细胞株)中加入非选择性或亚型特异性PDE抑制剂以及颗粒状鸟苷酸环化酶激动剂心房利钠肽(ANP)或可溶性鸟苷酸环化酶激动剂硝普钠(SNP),运用免疫细胞化学法观察细胞中cGMP的含量;用非放射性原位杂交法检测培养的人RPE细胞及鼠RPE细胞层中PDE2,5,9mRNA的表达。 结果:未加入PDE抑制剂时培养的RPE细胞中cGMP水平很低,当人RPE细胞与Bay60-7550(选择性PDE2抑制剂)、昔多芬(选择性PDE5抑制剂)或Sch51866(选择性PDE9抑制剂)共孵育时,可发现cGMP积聚。在有PDE抑制剂存在的条件下,给予颗粒状鸟苷酸环化酶激动剂后cGMP含量显著增加。培养的人RPE细胞及鼠RPE细胞层中均可检测到PDE2,5,9mRNA的表达。 结论:PDE2,5,9在RPE细胞cGMP代谢中起作用。
(编辑:宁夏)
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