目的：建立一种快速、灵敏、特异的诊断与鉴别真菌性角膜感染主要致病菌的分子生物学方法。 　　方法：分别选择镰孢菌特异性引物和曲霉菌、青霉菌、弯孢霉菌特异性引物，建立多重PCR反应体系，对串珠镰孢菌、木贼镰孢菌、禾谷镰孢菌、腐皮镰孢菌、烟曲霉菌、黄曲霉菌、黑曲霉菌、青霉菌、弯孢菌DNA进行检测，并观察该体系对人类DNA及其他眼部常见微生物DNA的检测结果。以第一轮扩增产物为模板用不对称引物进行第二轮扩增产生单链，进行单链构象多态性(SSCP)分析。 　　结果：多重PCR体系对镰孢菌扩增可以产生约300bp的特异性产物，对曲霉菌、青霉菌和弯孢菌扩增产生约236bp的产物，对人类DNA、沙眼衣原体及常见细菌DNA的扩增结果为阴性。第二轮扩增产物既含有双链DNA也含有单链DNA，根据两者间的相对泳动速率可以鉴别曲霉菌与青霉菌、弯孢霉菌的菌属。 　　结论：应用多重PCR联合PCR-SSCP技术检测角膜真菌感染主要致病菌具有简便、快速、准确可靠等优点，具有良好的临床应用前景。