目的：临床上寻找敏感的棘阿米巴感染检测方法能有效的阻止病情的恶化。为了提高对棘阿米巴感染的检测手段，本研究探讨采用real-time PCR扩增棘阿米DNA，从而达到诊断棘阿米巴感染的目的
   方法：将棘阿米巴囊胞与标记的病毒混合后，根据不同的DNA提取方法提取DNA。提取DNA采用：加热，蛋白酶k，碱裂解，QIAmp kit提取，MagNA纯化，蛋白酶k联合QIAmp提取及蛋白酶k 联合MagNA纯化。提取的寄主DNA采用real-time PCR进行扩增。
   结果：棘阿米巴囊胞能阻止DNA的提取。加热，碱裂解，蛋白酶K处理后提取的DNA在没有PCR抑制剂的情况下仍无法进行后续real-time PCR检测。QIAmp和MagNA纯化后敏检测感性部分提高。用蛋白酶K预处理然后再进行后续的检测能够显著的提高检出效率。蛋白酶k预处理再进行MagNA 纯化后检出效率最高。
   结论：为了减少假阴性结果，这种基于核酸反应的棘阿米巴诊断方法首先需要溶解囊胞（但不能损伤棘阿米巴的DNA）这样才能有效地进行后面的提取和扩增反应。第二，去除PCR抑制剂。用蛋白酶K预处理然后再进行后续的检测能够显著的提高检出效率。蛋白酶K联合MagNA纯化30分钟后检测效果最佳，随后是ProtK联合QIAmp处理150分钟检测效果次之。

(编辑：宁夏)

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