目的:Sorsby’s眼底退变是一种退行性视网膜病变,它以特征性的突变型TIMP-3蛋白在Bruch’s膜堆积为特征,除了常发生于生命的早期以外,它具有同ARMD相似的临床特点。此项目就是要比较结合态SFD突变型TIMP-3与野生型TIMP-3的稳定性。 方法:使用野生型含Ser181,Gly-167,Ser-156和Tyr-168的TIMP-3cDNA的质粒转染Cos-7细胞。随后收取细胞及细胞外基质并制成匀浆。用ELISA的方法测定基质结合态的野生型和SFD突变型中TIMP-3的浓度,将匀浆分装并加热至100℃。用反向酶谱分析的方法监测TIMP蛋白降解的比率。 结果:维持100℃24小时后两种TIMP-3的生物活性度都失了;但维持6小时高温后则发现突变型TIMP-3的活性仍然存在而野生型的已经完全消失。 结论:基质结合态SFD突变型TIMP-3比野生型TIMP-3具有更加稳定的热动力学特点。这可能解释为何SFD比ARMD发生的年龄更早。
(编辑:宁夏)
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