背景/目的:既往研究提示细胞复制功能的退化可能参与了年龄相关性疾病的发病过程,本研究中我们研究小梁网(TM)细胞的老化过程。 方法:取猪的小梁组织,放入DMEM/F12培养基中行原代培养。2~3周后原代移行及增殖细胞予胰蛋白酶进行消化,连续传代培养,并以TM细胞标志物——荧光素标记的低密度脂蛋白(DiI-Ac-LDL)进行细胞鉴定。在PH值为6、群体倍增水平(PDL)为2、8、16时行与衰老相关的β-半乳糖苷酶活性染色。在每一群体倍增水平采用32P标记的端粒特异性序列(TTAGGG)3以Southern blot法检测末端限制性酶切片断(TRF)的长度。 结果:DiI-Ac-LDL染色显示绝大多数(接近100%)细胞为TM细胞,这些细胞呈扁平外观,在PDL16时与衰老相关的β-半乳糖苷酶染色阳性。群体倍增时TRF长度缩小。 结论:体外培养的TM细胞在PDL16时出现老化的特点。本研究结果证实细胞衰老可能与原发性开角型青光眼的发病有关。
(编辑:宁夏)
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