目的:在早期S-抗原诱导的实验性葡萄膜炎中(EAU),光感受器线粒体蛋白在视网膜巨噬细胞浸润之前已被硝基化,提示氧化应激在EAU形成中是首先发生。我们尝试在EAU视网膜中检测氧化应激并使其局限化。 方法:以完全弗氏佐剂(CFA)中的S-抗原免疫路易鼠,动物只注射CFA而以非免疫动物作为对照。免疫和非免疫动物在第5天和随后的日子被处死,以实时聚合酶链反应(PCR)检测处理的离体视网膜诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、白介素-Ⅰα(IL-1α)和CD28的表达。此外在EAU第5天,iNOS被与细胞色素C氧化酶共同定位。用2',7'-二氯二氢荧光素乙酰乙酸盐检测氧化应激并用线粒体特异性标记物对其进行定位。通过免疫组织化学方法对视网膜/脉络膜的白细胞和T-细胞浸润进行评估。 结果:在EAU第5天,iNOS、TNF-α、IFN-γ、IL-1α和CD28转录物被显著上调,在光感受器线粒体,iNOS被与细胞色素C氧化酶共同定位。氧化应激主要在光感受器线粒体被观察到。在这一阶段的视网膜偶尔存在T-淋巴细胞。 结论:在早期EAU,线粒体氧化应激在光感受器内节被选择性观察到,氧化应激似乎起因于光感受器线粒体的iNOS上调和由少数抗原特异性浸润T细胞引起的视网膜细胞因子的产生。
(编辑:千岛菊)
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