眼病理检验(眼部活体组织检查，又称活检)是眼病诸多诊断方法中较重要的一种。通过手术切除病变组织，用光镜、电镜或免疫组织化学等方法检查，可了解眼病的性质，区别炎症和肿瘤，了解肿瘤为良性或恶性及其起源，为临床诊断和治疗提供依据，是提高眼病诊断及科研水平不可或缺的方法。
一、眼病活检指征
(1)眼及附属器(眼睑、结膜、泪器和眼眶)异常组织，结节或肿块。睫状体和脉络膜淋巴细胞浸润中可见上皮样细胞聚集成结节状，其中可见吞噬黑色素的细胞及多核巨细胞，视网膜外层上皮样细胞聚集形成Dalen—Fuch结节。另有不典型的组织学改变，包括视网膜、视乳头水肿，淋巴细胞浸润或环绕血管周围。淋巴细胞可浸润巩膜实质，浸润神经，亦可侵犯后睫状血管周围，致血管管腔不规则,甚者可致血管闭塞。
(2)不典型的“麦粒肿"或“霰粒肿”。
(3)角膜感染性炎症或溃疡。
(4)因视力丧失或伴疼痛摘除的眼球。
二、活检组织固定、取材、切片及染色
(1)固定：手术切除的眼部软组织，如眼睑、结膜、眼外肌及眶内组织或眼球，立即置于4％中性甲醛溶液固定。眼球可用眼球固定液(浓甲醛10ml，冰醋酸5ml，95％乙醇50ml，加蒸馏水35m1)，此固定液对眼球壁穿透性强，固定效果好。以--法固定眼球均需保持24小时，并不用水洗。
(2)标本取材：首先要做肉眼检查(巨检)，观察并记录病变组织大小、颜色、硬度，切面所见有无包膜、出血、坏死或囊性变。眼球则需测定其前、后径，水平及垂直径，角膜直径和视神经长度及其直径。取材即切取病变组织，一般较小软组织如小梁等，应用绸布(或纸)包，用依红染色，全部送检。稍大组织(1-2cm)，沿病变组织最大径切开,切送组织厚4-5mm.更大的组织,如眼睑恶性肿瘤,临床手术切除时应标记病变的上下及内外,取材及出报告时需要注明上下及内外检查所见.
对眼球需先鉴定左、右眼。以视神经两侧后长睫状动脉穿人巩膜定水平位，上斜肌附着点定眼球上方，视神经略偏鼻侧，据此可定出送检的眼球是左眼或右眼。眼球标本的常规切开方法：前经角膜中心，后经视神经中央的水平位置环行切开。对临床诊断球内肿瘤者，应先用镊尖在球壁上探测，有实体感者，即肿瘤所在部位，通过肿瘤中央的球壁做环形切开。球内肿瘤较大者，宜切取5mm厚最大面组织送检，观察并记录球内肿瘤的颜色，测定其最大径及高度，肿瘤侵犯的范围，视神经切面及断端有无肿瘤侵犯。
(3)常规HE染色做光学显微镜检查诊断：HE染色不能诊断者，根据需要做组织化学染色，如疑为肌原性者可做马氏三色，肌肉染红色，纤维染蓝色。黑色素性病变可做Fontana染色，可发现胞浆内含色素颗粒。横纹肌肉瘤PTAH染色，可显示横纹。淀粉样变性刚果红染色现砖红色。特殊染色对了解病变的组织起源有很重要的作用。
(4)需做电镜检查者，术中切除4mm×lmm病变组织用3％戊二醛固定，包埋、超薄切片。通过超微结构观察，可观察到细胞结构特点，确定肿瘤起源及细胞核、细胞器的改变。
(5)免疫组织化学检查，在肿瘤病理学中已经成为很重要的诊断方法。可将冰冻保存的组织、福尔马林固定石蜡包埋的组织或各种方式得到的细胞(如穿刺，涂片，血液分离和培养细胞等)送检。常用的方法有ABC法和PAP法。ABC法的优点是敏感性高，其敏感度为PAP法的加～40倍，并且背景清晰，尤其适用于单克隆抗体。免疫组化方法可确定肿瘤的起源；估计转移I生肿瘤的原发灶；确定肿瘤的增生活性并由此估计预后，还可区别肿瘤和非肿瘤性病变，但只限于恶性淋巴瘤中B细胞小细胞性淋巴瘤，与良性反应性淋巴增生的鉴别，通过λ和κ轻链染色，λ和κ二者染色均为阳性者属多克隆增殖，为良性反应性淋巴增生，λ和κ染色只有其中一种阳性者，即为单克隆增生性病变，属低恶性淋巴瘤，可提示采用相应的治疗方法，后者可考虑局部放射治疗。
三、眼病理诊断
根据光镜检查结果，必要时应用免疫组织化学或电镜检查。眼病理报告与普通病理报告相同，可以有以下几种结果：
(1)肯定性诊断：病理改变很典型者，如查见结核结节，有干烙样坏死及郎罕氏细胞，查见抗酸杆菌，可确诊结核。又如儿童球内肿瘤，有RB肿瘤细胞的特征，特别是有典型的F—W菊形团者，可肯定诊断为视网膜母细胞瘤。软组织如眼睑、眼眶等肿瘤，需报告肿瘤侵犯范围，边缘或底部有无肿瘤残存。眼球内肿瘤，应写明肿瘤侵犯组织，如脉络膜、巩膜、视神经及视神经的断端。
(2)病变符合临床诊断。
(3)多系性诊断，因形态学不很典型，但可能性很大。
(4)疑为或可能性诊断，因病变不典型。
(5)不能排除某某病，只有10％一30％的可能性。
(6)对病变只能作形态描述，无法提出诊断意见。
对3～6报告，临床医师应结合临床表现，对需要者可重做活检。
四、眼病理诊断注意事项
(一)眼病理诊断需注意事项
(1)了解患者的年龄、症状和体征以及病程。
(2)切取病变组织，避免遗漏。
(3)全面观察切片，必要时做特殊染色，免疫组化及电镜检查确定诊断。 (4)病理所见与临床表现不相符合者，如病理所见为炎性坏死组织，而临床所见为肿块或疑为肿瘤时应提示临床医生考虑再做活检。
(二)眼科临床医师的职责
(1)清楚、科学的书写病理检验单，对病变作重点描述，最好画图表示。注明患者有关情况，如癌病史、旧病理诊断结果等。
(2)手术中准确切除病变组织，如疑为基底细胞癌有溃疡者，活检应相应切送边缘部包括溃疡及邻近貌似正常的组织，不宜只切取表面溃疡组织。术中勿挤压病变组织，避免切片中细胞变形，影响诊断。
(3)病理诊断结果与临床表现不符，可提请病理医师再做切片或重做活检。
(4)根据病理诊断结果做适当处理，如病理诊断提示有肿瘤残存，应尽快扩大切除。视神经断端有肿瘤侵犯，或眼球外有肿瘤扩张者，应考虑做眶内容挖出术。恶性肿瘤应告知患者家属需前往肿瘤科做进一步治疗。
(5)对眼部恶性肿瘤患者需定期随访或信访，使能得到及时处理及了解该病的发展过程及预后。
摘自:何守志<临床眼科学>
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